LÍNEAS DE INVESTIGACIÓN

Fundación Inclínica trabaja en dos líneas de investigación: cáncer broncopulmonar y protozoos en vías aéreas.

CANCER DE PULMÓN

El grupo de trabajo que investiga sobre el cáncer de pulmón realiza sistemáticamente cultivo celular de piezas resecadas de cáncer broncopulmonar. Los cultivos de los explantes han crecido sin fracasar, para todas la estirpes celulares cultivadas: epidermoide, adenocarcinoma, anaplásico y neuroendocrino.

El mantener cultivos celulares de rápido crecimiento, alrededor de una semana, permite realizar estudios de actividad citolítica de los agentes quimioterápicos, con aplicación clínica inmediata, además de abrir otras líneas de investigación. El rápido crecimiento que se obtiene permite la utilización de tales cultivos en futuros beneficios dentro del campo de la quimioterapia.

Carcinoma microcítico de pulmón (2000x).

PROTOZOOS EN VÍAS AÉREAS

Este relevante aspecto de la investigación aconseja seguir tres tipos de estudios:

1. Características de los microorganismos hallados en las secreciones de las vías respiratorias.

2. Repercusión de las formas protozoarias en determinadas enfermedades del aparato respiratorio.

3. Implicación de ciertos artrópodos (ácaros del polvo y cucarachas) en las alergias respiratorias.

1.  Características de los microorganismos hallados en las secreciones de las vías respiratorias (morfología, estudio del ciclo vital, cultivo e intento de clasificación taxonómica de las formas protozoarias).

Mediante diversas técnicas se pretende estudiar la morfología, ciclo vital, cultivo y clasificación taxonómica de las formas protozoarias observadas en las secreciones de las vías respiratorias.

Uno de los aspectos clave de esta investigación es establecer una diferencia, basándonos en una serie de criterios morfológicos mediante microscopía convencional, entre lo que consideramos, por una parte, lo que pueden ser nuevas formas protozoarias, y por otra, lo que son restos citoplasmáticos de células bronquiales ciliadas (CCT). Hay que reconocer que el dilema entre la posible existencia de parásitos ciliados y la presencia de restos citoplasmáticos de células ciliadas no es un problema nuevo, ya que, desde que se mencionan por primera vez (Papanicolaou, 1956; Pierce and Hirsch, 1958) unas alteraciones en las células bronquiales ciliadas, conocidas con el nombre de "Ciliocytophthoria", han surgido numerosas publicaciones al respecto (Papanicolaou et al, 1961; Rosenblatt et al, 1963; Kim et al, 1964; Monteforte and Maida, 1968; Papaioanou et al, 1969; Hollander and Gupta, 1974; Muller and Beyer-Boon, 1975; Huisjes, 1976; Rilke and Alasio, 1976; Jabamoni et al, 1977; Hollander and Gupta, 1979; Husami et al, 1981; Coleman, 1986; Poropatich and Ehya, 1986; Roxby et al, 1986; Sidawy et al, 1987; Kuritzkes et al, 1988; Sasaki et al, 1988; Ashfaq-Drewett et al, 1990; Hubel et al, 1990; Nosanchuk, 1993; Mahoney et al, 1993; Stanley et al, 1995; Cormiter et al, 1995; Ribas and Mosquera, 1998; Hadziyannis et al, 2000; Ribas et al, 2003).

• Formas protozoarias:

Imágenes en movimiento. Los dos vídeos mostrados fueron obtenidos con objetivo de inmersión y pertenecen a muestras en fresco de esputos de pacientes asmáticos.

(El tiempo de descarga de los vídeos irá en función de las características de su conexión)

- Ver vídeo 1 (3.3 Mb)

- Ver vídeo 2 (4.4 Mb)

Esputos en fresco. Las imágenes han sido obtenidas con objetivo de inmersión (1000x).

Esputos en el asma bronquial. Todas las imágenes presentadas (una de ellas observada con luz ultravioleta), han sido obtenidas a 1000x y pertenecen a extendidos citológicos teñidos con el método de Papanicolaou.

Esputos en el SIDA. Todas las imágenes presentadas han sido obtenidas a 1000x. Seis de ellas pertenecen a extendidos citológicos coloreados con el método de Papanicolaou, y las cinco restantes con el tricrómico de Wheatley.

Rinitis alérgica. Las imágenes presentadas corresponden a exudados nasales y han sido obtenidas a 1000x. Dos de ellas han sido coloreadas con el método de Papanicolaou, y la restante con el tricrómico de Wheatley.

•  CCT y células bronquiales ciliadas:

Esputos en fresco. Las imágenes han sido obtenidas con objetivo de inmersión (1000x).

Extendidos con Pap. Las imágenes corresponden a extendidos de esputo coloreados con el método de Papanicolaou y obtenidas a 1000x.

2. Repercusión de las formas protozoarias en determinadas enfermedades del aparato respiratorio.

Nuestros estudios van encaminados a demostrar que puede existir una relación causa-efecto entre protozoos multiflagelados y determinadas enfermedades del aparato respiratorio como asma bronquial, rinosinusitis alérgica, neumonías intersticiales inespecíficas, etc.

Además de los estudios realizados en pacientes asmáticos, con rinitis alérgica y SIDA, se está llevando a cabo un seguimiento de pacientes inmunodeprimidos que ingresan en la UCI por un fallo respiratorio severo.

3. Implicación de ciertos artrópodos (ácaros del polvo y cucarachas) en las alergias respiratorias.

Desde que se demostró la relación entre los ácaros del polvo doméstico y la alergia respiratoria (Voorhorst et al., 1964), más de tres mil trabajos han sido publicados sobre el tema.

Nuestro equipo de investigación, estudiando y analizando el polvo doméstico, ha dado con un hallazgo que pensamos puede ser de suma importancia. Se han observado unas estructuras con proyecciones filiformes, compatibles con formas protozoarias en el contenido intestinal de los ácaros del polvo (la especie estudiada es el Dermatophagoides pteronyssinus ). Dicho hallazgo se describe por primera vez en la literatura. Su importancia se debe al hecho de la gran similitud existente entre las formas protozoarias observadas en los esputos de los pacientes asmáticos y las observadas en el contenido intestinal de los ácaros del polvo, por lo que se potencia la relación entre ácaros y asma bronquial.

Por otra parte, también han sido observadas estructuras similares en los extractos del contenido intestinal de las cucarachas (la especie estudiada fue la Blatella germánica ).

Las imágenes corresponden a dos ácaros del polvo (Dermatophagoides pteronissinus) tal como se puede observar, según nuestra técnica de manipulación, en suero salino (200x); y a diferentes formas protozoarias halladas en los extractos del contenido intestinal de los ácaros del polvo y observadas en fresco (1000x).

• Ácaros del polvo en esputo.

La presencia de ácaros en el esputo está documentada en la literatura (Farley et al. 1989, Ryu et al. 2003). Además de su inhalación (Nadchatram 2005), se ha postulado sobre la presencia de ácaros en el interior de las vías respiratorias y su relación con el asma bronquial (van Woerden 2004).

Nosotros hemos experimentado un sencillo procedimiento, mediante la licuación del esputo con lejía, para identificar ácaros del polvo en muestras procedentes de expectoraciones (ver trabajos publicados).

Las imágenes corresponden a varios ácaros del polvo, introducidos previamente en muestras procedentes de expectoraciones, tal como se observan al microscopio en extendidos de esputo en fresco (200x) y teñidos con el método de Papanicolaou (200x).

Las imágenes corresponden a dos ácaros del polvo (visión lateral y dorsal), tal como se observan al microscopio, después de licuar con lejía las expectoraciones en las cuales habían sido introducidos con anterioridad.