Actividades 2007

Durante el año 2007, la recién creada unidad de investigación en patología respiratoria protozoaria realizó los siguientes estudios de investigación:

• Estudio retrospectivo sobre la presencia de monocitos en extendidos citológicos de esputo. Se examinaron 1234 extendidos, de los cuales 101 (16,3%) contenían monocitos. De estos últimos, en 73 (72,2%) se observaron formas protozoarias.

• Estudio sobre inmunosupresión y patología respiratoria. Se estudiaron tres pacientes con SIDA y con clínica respiratoria característica, observándose en muestras de aspirados bronquiales y esputos la presencia de protozoos flagelados. Dicho estudio fue presentado en el XXXIII European Congress of Cytology, celebrado en Madrid (14-17 de octubre).

• Estudio basado en una revisión bibliográfica de la literatura médica sobre protozoos y aparato respiratorio. Se revisaron 109 publicaciones, contando para ello con la colaboración del Prof. Guillermo Esteban, del departamento de parasitología de la universidad de Valencia. Dicho estudio será la base de una futura publicación en una revista de la especialidad.

Actividades 2006

Brevemente se describen las actividades realizadas por el grupo de trabajo que estudia la repercusión de las formas protozoarias en el aparato respiratorio:

• Basándonos en trabajos publicados que relatan la inmunoreactividad de la Trichomona vaginalis con la p16 (Pantanowitz et al, 2005), realizamos diversos ensayos en extendidos de esputo en fresco y teñidos con Papanicolaou, ambos positivos para formas protozoarias. No se obtuvieron resultados de inmunotinción positiva.

• Estudios de microscopía electrónica de transmisión (MET) en ácaros. De los cortes semifinos realizados en 2005, sólo fueron buenas para ultramicrotomía dos secciones. Durante el primer trimestre de 2006 se realizaron los primeros cortes ultrafinos. En las imágenes obtenidas con MET no se han reconocido estructuras compatibles con formas protozoarias. Durante el último trimestre de 2006 se ha vuelto a intentar un nuevo análisis, lográndose incluir en resina para cortes semifinos y ultrafinos 20 especimenes.

• Del grupo de trabajo establecido con el departamento de epidemiología, estadística y salud pública de la universidad de Cardiff, se recibieron 22 extendidos de esputo, fijados con aerosol, correspondientes a 11 pacientes. Los extendidos fueron teñidos con el método de Papanicolaou y examinados por dos observadores. Solamente 5 muestras fueron positivas para formas protozoarias.

• Se continuaron los ensayos con el procedimiento de licuar esputos en fresco con hipoclorito sódico, contaminándolos previamente con ácaros del polvo. En diversos tipos de expectoración (serosa, mucosa, purulenta y hemoptoica) se logró una efectividad de recuperar ácaros del 80%.

• Se ha comenzado un estudio sobre la presencia de monocitos en extendidos de esputo teñidos con Papanicolaou. Además de caracterizar dichas células morfológicamente y mediante inmunotinción con CD68, dicho estudio pretende apreciar si existe relación entre la presencia de monocitos y la de formas protozoarias observadas en los extendidos citológicos.

• Se han realizado estudios en muestras (lavados bronco-alveolares y aspirados traqueo-bronquiales) de pacientes inmunodeprimidos, con fallo respiratorio severo, ingresados en UCI. Las muestras recibidas se examinaron al microscopio en fresco y con tinción de Papanicolaou, observándose la presencia de formas protozoarias.

ACTIVIDADES 2005

A continuación de describen, de forma somera, las actividades que ha llevado a cabo el grupo de trabajo que estudia la repercusión de las formas protozoarias en el aparato respiratorio:

• En relación con el estudio de ciertas formas de cáncer de pulmón en extendidos citológicos de esputo y presencia de formas protozoarias, hasta el momento se han analizado un total de 402 muestras. De ellas, 172 corresponden a carcinoma escamoso, 131 a carcinoma microcítico, 90 al adenocarcinoma y 9 a carcinoma anaplásico de célula grande. Aunque pudimos constatar un ligero aumento de las formas protozoarias en los esputos que corresponden al adenocarcinoma (68% frente a 52% del resto), dicho incremento no fue estadísticamente significativo.

• Se han realizado varios ensayos con el compuesto fluorescente Bromuro de Etidio, con la finalidad de teñir específicamente a las formas protozoarias. Los resultados obtenidos han sido negativos en cuanto a positividad en la fluorescencia de las formas protozoarias en extendidos de esputo.

• Se ha mejorado la capacidad de detección de cuerpos extraños en los esputos, incluyendo ácaros del polvo, mediante la licuefacción de las secreciones y aclaramiento de las mismas con hipoclorito sódico a diferentes concentraciones, y posterior observación microscópica en fresco. Por el momento destacamos la sencillez del método y su bajo coste económico.

• Se ha establecido un grupo de trabajo con el departamento de Epidemiología, Estadística y Salud Pública de la Universidad de Cardiff (UK), coordinado por el Dr. Hugo van Woerden. El trabajo lleva por título: "Investigation of the presence of micro-organisms in sputum". Mediante dicho estudio epidemiológico se intenta detectar, en un determinado grupo de población, la existencia en los esputos de: ácaros del polvo, proteína DerP1 y formas protozoarias.

• Se mantiene la cooperación, en determinados trabajos de investigación, con los profesores Dr. José-Guillermo Esteban (Departamento de Parasitología de la facultad de farmacia de la Universidad de Valencia) y Dr. Rafael Tormo Molina (Departamento de Biología y producción vegetal de la Universidad de Extremadura).

• Se continúa con el estudio sobre la presencia de formas protozoarias en el contenido intestinal de los ácaros del polvo, intentando su visualización en el interior de los mismos a través de la microscopía electrónica de transmisión. Por el momento se ha realizado la selección de ácaros, fijación en paraformaldehido-glutaraldehido, postfijación con Osmio, inclusión en resina y cortes semifinos. En dicho estudio colabora el Dr. Ricardo Andrade, del Servicio General de Microscopía Analítica y de Alta Resolución en Biomedicina, de la Universidad del País Vasco.

Por otra parte, el grupo de trabajo que investiga sobre el cáncer de pulmón realiza sistemáticamente cultivo celular de piezas resecadas de cáncer broncopulmonar. Los cultivos de los explantes han crecido sin fracasar, para todas la estirpes celulares cultivadas: epidermoide, adenocarcinoma, anaplásico y neuroendocrino. El rápido crecimiento que se obtiene permite la utilización de tales cultivos en futuros beneficios dentro del campo de la quimioterapia.